Efeito da luz ultravioleta na eclodibilidade e viabilidade de pintos provenientes de ovos férteis sujos / Effect of ultraviolet light in hatchability and viability of chicks from dirty fertile eggs

Considerando a necessidade de se desenvolver estratégias para a incubação de ovos sujos e a demanda de se utilizar métodos renováveis de sanitização, a utilização da luz ultravioleta para desinfecção de ovos incubáveis sujos foi o objetivo desta pesquisa. Foram avaliados ovos sem desinfecção (C-), desinfetados com paraformaldeído (C+), e expostos a tempos diferentes de exposição ultravioleta: UV 3’30”, UV 4’30” e UV 5’30”. Os ovos C(+) e os expostos à UV por 3’30” e 5’30” tiveram uma redução significativa na quantidade de colônias na casca dos ovos em relação ao C(-), variando de 0.64 a 1 logUFC/g. Os tratamentos C(+), UV 3’30” e UV 5’30” foram aplicados para avaliação da incubabilidade dos ovos. A eclodibilidade do tratamento UV 3’30” (70,51%) foi superior ao UV 5’30” (51,16%) e similar ao C(+) (55,81%). Conclui-se que o tratamento UV 3’30” é eficaz na redução da contaminação microbiológica de ovos sujos e não afeta negativamente a eclodibilidade e a viabilidade dos pintinhos nascidos.

Considering the need to develop strategies for dirty eggs incubation and the demand to use renewable methods of sanitation, the use of ultraviolet light for disinfecting hatching dirty eggs was the objective of this research. Eggs not disinfected (C-), disinfected with paraformaldehyde (C+) and exposed to different times of UV radiation (UV 3’30”, UV 4’30” and UV 5’30”) were tested. The eggs C(+) and those exposed to UV for 3’30” and 5’30” presented a significant reduction on the number of colonies of eggshells comparing to C(-), with a 0.64 to 1 logUFC/g variation. The treatments C(+), UV 3’30” and UV 5’30” were applied in an incubation phase. The hatchability of treatment UV 3’30” (70,51%) was superior to UV 5’30” (51,16%) and alike C(+) (55,81%). In conclusion, the treatment UV 3’30” is effective in reducing microbiologic contamination of dirty eggs and do not affect negatively hatchability and quality of chicks.

Bacterial culture and antibiotic sensitivity from the ocular conjunctiva of horses / Cultura e sensibilidade bacteriana da conjuntiva ocular de equinos

ABSTRACT: The aim of this study was to identify the conjunctival bacterial flora of healthy horses in Brasilia (Distrito Federal, Brazil), and to evaluate the antimicrobial susceptibility of the isolated strains. We examined 200 eyes of 100 healthy adult horses without any eye problems, belonging to the 1st Regiment of the Cavalry Guard (RCG) of the Brazilian Army in Brasilia. Samples were collected from the inferior conjunctival fornix of both eyes. Drug sensitivity test was performed with the antibiotics gentamicin (10µg), tobramycin (10µg), chloramphenicol (30µg) and ciprofloxacin (5µg). Of the 200 samples collected, 131 (65.5%) were considered positive for bacterial growth. A total of 208 bacterial strains belonging to 19 genera were isolated, where there was prevalence of gram-positive bacteria (65%), with Staphylococcus sp. being the species of greatest incidence. It was observed that 94, 85, 81 and 68% of the isolates were sensitive to ciprofloxacin, gentamicin, chloramphenicol and tobramycin, respectively. These results can guide the empirical selection antimicrobial therapy for infections of the ocular surface of horses, pending the identification of the etiologic agent.

RESUMO: Objetivou-se identificar a flora bacteriana conjuntival de cavalos saudáveis, residentes de Brasília (Distrito Federal - Brasil), e avaliar a susceptibilidade antimicrobiana das cepas isoladas. Foram avaliados 200 olhos de 100 equinos hígidos, adultos, saudáveis e sem alterações oculares, provenientes do 1o Regimento de Cavalaria de Guarda (RCG) do Exército de Brasília. As amostras foram coletadas do fórnix conjuntival inferior de ambos os olhos. O teste de sensibilidade foi realizado para os antimicrobianos: gentamicina (10mcg), tobramicina (10mcg), cloranfenicol (30mcg) e ciprofoxacino (5mcg). Das 200 amostras coletadas, 131 (65,5%) foram consideradas positivas para o crescimento bacteriano. Um total de 208 bactérias pertencentes a 19 gêneros foram isoladas, verificando-se prevalência de bactérias gram-positivas (65%), sendo Staphylococcus sp, a espécie de maior incidência. Foi observado que 94%, 85%, 81% e 68% das bactérias isoladas foram sensíveis ao ciprofloxacino, à gentamicina, ao cloranfenicol e à tobramicina, respectivamente. Tais resultados podem direcionar a escolha empírica da terapêutica antimicrobiana nas afecções da superfície ocular de equinos, enquanto se aguarda a identificação do agente etiológico.

Deficiência de cobre em suínos: caracterização clínico-patológica / Copper deficiency in swine: clinical-pathologic characterization

São relatados dois casos de deficiência de cobre em suínos (A e B), fêmeas, sem raça definida, de três meses de idade, provenientes de propriedade rural em Planaltina, GO. Os animais apresentavam incoordenação, paresia de membros pélvicos, com progressão para os membros torácicos e andar com flexão da articulação metacarpo-falangeana. Na propriedade de origem dos animais, outros dois suínos apresentavam atrofia da musculatura da coxa e posição sentada quando parados. O rebanho recebia dieta não-balanceada constituída por milho, soro de leite e sobras de lavoura. Na necropsia, não foram observadas alterações significativas, mas histologicamente havia vacuolização periaxonal multifocal no tronco encefálico e na medula espinhal, quantidade discreta de esferoides axonais e macrófagos no interior dos vacúolos. A coloração com azul rápido de luxol (ARL) para mielina demonstrou que as áreas de vacuolização caracterizavam focos de desmielinização. Amostras de fígado dos dois suínos apresentaram níveis de cobre muito abaixo do normal, de 13,1 partes por milhão (ppm) (suíno A) e 5,7ppm (suíno B). Este trabalho descreve dois casos de desmielinização medular e de tronco encefálico devido à deficiência de cobre em suínos jovens.

Two cases of copper deficiency are described in three-month-old female crossbred piglets from a swine herd in Planaltina, GO. The animals presented incoordination, hindlimbs paresis progressing to the forelimbs, and gait with flexion of the metacarpofalangeal articulation. On the farm of origin of the animals, other two piglets presented atrophy of thigh muscle and sitting position when in station. The herd was fed with unbalanced diet consisting of corn, whey and leftover crop. On necropsy no significant changes were observed, but histologically there was multifocal periaxonal vacuolization in the brainstem and in spinal cord, discrete amount of axonal spheroids and macrophages in the vacuoles. The luxol fast blue (LFB) stain for myelin showed that the vacuolated sites represent demyelinated areas. Liver sample of the two piglets had very low copper levels, 13.1 parts per million (ppm) in swine A and 5.7 (ppm) in swine B. This paper describes two cases of spinal cord and brainstem demyelination due to copper deficiency in piglets.

Análise microbiológica da placa bacteriana da doença periodontal em cães e o efeito da antibioticoterapia sobre ela / Microbiological analysis of bacterial plaque of periodontal disease on dogs and effects of antibioticotherapy on it

Objetivou-se determinar a microbiota da placa bacteriana subgengival de cães com doença periodontal (DP) e estabelecer o efeito da antibioticoterapia. Avaliaram-se 20 cães com graus variados de DP e coletaram-se amostras da placa bacteriana subgengival antes e após antibioticoterapia. Preconizou-se antibioticoterapia distinta em dois grupos, com 10 animais cada: clindamicina (G1) e metronidazol + espiramicina (G2). Observou-se crescimento bacteriano subgengival na maioria dos cães com DP e correlação entre a severidade da DP e a idade dos animais. Houve redução significativa no crescimento bacteriano após a antibioticoterapia e o antibiograma demonstrou maior sensibilidade à clindamicina, seguido da espiramicina; todos os microrganismos foram resistentes ao metronidazol.

The objective was to determine microbiote of the subgingival bacterial plaque of dogs with periodontal disease (PD) and establish the effect of antibioticotherapy on its reduction. Twenty dogs with varied stages of PD were evaluated and samples of their subgingival bacterial plaque were collected. Distinct antibiotic protocols were used in two groups with ten animals each: clindamycin (G1) and metronidazole + espiramycin (G2). New subgingival samples were collected 15 days after antibiotic therapy started. There were observed subgingival bacterial culture on most dogs with PD and correlation between severity of PD and age. There was reduction of bacterial growth in 20 percent of the samples after treatment and antibiogram showed higher sensibility to clindamycin, followed by espiramycin - all microorganisms were resistant to metronidazole.

Síndrome do abscesso pituitário em bezerros na Região Centro-Oeste / Pituitary abscess syndrome in calves from Mid-Western Brazil

A síndrome do abscesso pituitário é uma doença neurológica responsável por casos esporádicos e surtos, principalmente em bezerros, ocasionando alto índice de mortalidade. Descreve-se a ocorrência e os achados clínicos, laboratoriais e anátomo-patológicos em três bezerros com síndrome do abscesso pituitário no Centro-Oeste do Brasil. Os animais tinham 8-11 meses de idade e os sinais clínicos mais marcantes relacionaram-se aos sinais nervosos de origem cerebral e do tronco encefálico com evolução clínica de 7-20 dias. A hematologia revelou leucocitose por neutrofilia e hiperfibrinogenemia. A análise do líquido céfalo-raquidiano apresentou pleocitose neutrofílica. Arcanobacterium pyogenes foi isolado do líquido céfalo-raquidiano. Um dos bezerros apresentou recuperação após antibioticoterapia. A mortalidade foi de 66,6 por cento (2/3). Os achados de necropsia consistiram em um único abscesso de localização parapituitária ou situado no parênquima da glândula; um dos bezerros apresentou rinite necrosante e outro, broncopneumonia abscedativa. O exame histológico do sistema nervoso central revelou ausência quase completa do tecido hipofisário normal, devido à necrose extensa e infiltrado inflamatório neutrofílico difuso concomitante. Reitera-se a importância da realização de práticas de manejo adequadas a fim de reduzir a incidência de inúmeras enfermidades, principalmente em bezerros, dentre elas a síndrome do abscesso pituitário.

Pituitary abscess syndrome is a neurologic disease responsible for sporadic cases and outbreaks especially in calves leading to high mortality rates. This paper aimed to report the occurrence and the clinical, laboratorial and pathologic findings in three 8 to 11-month-old calves with pituitary abscess syndrome from Mid-Western Brazil. The most important clinical findings were nervous signs of cerebral and brainstem origin with clinical evolution of 7-20 days. Hematology revealed leucocytosis by neutrophilia and hyperfibrinogenemia. Cerebrospinal fluid analysis showed neutrophilic pleocytosis. Arcanobacterium pyogenes was isolated from cerebrospinal fluid. One calf recovered after antibiotic treatment. Mortality rate was 66.6 percent (2/3). Necropsy findings included single para-hypophyseal abscesses or located in the glandular parenchyma; one calf showed necrotizing rhinitis and another abscedative pneumonia. Histological exams of the central nervous system reveal complete absence of normal pituitary tissue due to the wide necrosis and neutrophilic inflammatory infiltrate. The authors reiterate the importance of adequate management practices to reduce incidence of several diseases especially in calves, including the pituitary abscess syndrome.

Cloning and expression of Aujeszky's disease virus glycoprotein E (gE) in a baculovirus system

Aujeszky' s disease (AD) is an infectious disease causing important economic losses to the swine industry worldwide. The disease is caused by an alpha-herpesvirus, Aujeszky' s disease virus (ADV), an enveloped virus with a double stranded linear DNA genome. The ADV genome encodes 11 glycoproteins, which are major targets for the immune system of the host in response to the infection. The glycoprotein E (gE) is a non-essential protein and deletion of the gE gene has been used for the production of marker vaccines. Aiming to develop molecular reagents for the production of a gE specific ELISA test, the gE gene was amplified by PCR, cloned and expressed into a baculovirus expression system. The recombinant DNA vector pFastBac-gE-ADV was used for site-specific transposition into the recombinant baculovirus (bacmid). Colonies with recombinant bacmid-pFastBac-gE-ADV were selected by antibiotic and color selection and the presence of the gE gene was confirmed by PCR. The recombinant bacmid-pFastBac-gE-ADV was cotransfected in insect Trichoplusia ni and the presence of the recombinant DNA and gE protein were detected by PCR, SDS-PAGE and Western blotting, respectively.

A doença de Aujeszky (DA) é uma enfermidade infecto-contagiosa que causa grandes perdas econômicas ao produtor e à agroindústria suinícola em todo o mundo. É causada pelo vírus da doença de Aujeszky (VDA), um alfaherpesvírus envelopado com genoma DNA de fita dupla e linear. O genoma do VDA codifica 11 glicoproteínas, as quais são os maiores alvos do sistema imune do hospedeiro em resposta a infecção. A glicoproteína E (gE) é uma proteína não essencial e a deleção do gene da gE é muito utilizada para a produção de vacinas com marcadores. Com o objetivo de desenvolver insumos moleculares para a produção de um teste de ELISA específico para gE do VDA, a seqüência do gene da gE foi amplificada, clonada e expressa no sistema de expressão em baculovírus. O produto da amplificação foi clonado no vetor pGem®-T Easy e subclonado no plasmídeo de expressão pFastBac™1. O DNA recombinante pFastBac-gE-VDA foi usado para a transposição sítio-específica no baculovírus recombinante (bacmid). Após seleção por antibióticos e cor, as colônias com o recombinante bacmid-pFastBac-gE-VDA foram selecionadas e a presença do gene da gE foi confirmada por PCR. O DNA recombinante viral, bacmid-pFastBac-gE-VDA, foi usado para cotransfecção de células de inseto Trichoplusia ni e a presença do recombinante e a proteína gE foi determinada por PCR, por SDS-PAGE e Western blotting, respectivamente.

Utilizaçäo de técnicas direta (cultivo) e indireta (coloraçäo de DNA pelo DAPI) para detecçäo de micoplasmas contaminantes de cultivos celulares / Utilization of direct (culture) and indirect (DNA colorization by DAPI) tecniques for Mycoplasma contaminants detection in cell culture

Trinta cultivos celulares de cinco Instituiçöes de Ensino e Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro foram testadas por duas técnicas diferentes, cultivo em caldo e agar SP4 e coloraçäo de DNA, para a detecçäo de micoplasmas contaminantes de cultivos celulares, que säo, na atualidade, os causadores de maior prejuízo para laboratórios, mas näo foram encontrados resultados positivos.

Utilização de técnicas direta (cultivo) e indireta (coloração de DNA pelo DAPI) para detecção de micoplasmas contaminantes de cultivos celulares

Trinta cultivos celulares de cinco Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro foram testadas por duastécnicas diferentes, cultivo em caldo e agar SP4 e coloração de DNA, para a detecção de micoplasmas contaminantes decultivos celulares, que são, na atualidade, os causadores de maior prejuízo para laboratórios, mas não foram encontradosresultados positivos.